特異性診斷是為確定變態(tài)反應性疾病者的血清或組織中存在著哪些抗體而作的診斷性測定。變態(tài)反應性哮喘的特異性檢查方法有以下六種,但應結合病史等進行綜合診斷。

    (1)皮膚試驗

    皮膚試驗是最常用的特異性檢查,包括斑貼、劃痕、挑刺和皮內注射等。臨床上以挑刺和皮內試驗最為常用,如挑刺試驗陰性,可作皮內試驗復查。

    ①方法與原理:特異性患者接觸過敏原后,可誘導產(chǎn)生特異性IgE,此種抗體粘附于皮膚或粘膜下層的肥大細胞表面的IgE受體上,當它與再次進入體內的過敏原相遇形成1個過敏原與2個IgE抗體的橋連,致使肥大細胞內發(fā)生一系列生化過程,釋放過敏介質,在皮膚局部產(chǎn)生風團, 紅暈或瘙癢。在患者前臂內側,常規(guī)消毒,然后用OT針筒,4號注射針頭吸入不同種過敏原浸液分別注于前臂內側皮內0.02ml,抗原點之間距為2.5cm。皮膚試驗15～20分鐘后,觀察皮膚反應,局部風團及紅暈大小,與對照點相比較。

    ②結果判斷: a.陰性: 無丘疹及紅暈,或非常輕微的紅暈; b.可疑:紅暈小于0.5cm。C.陽性:伴有紅暈的風團0.5;伴有紅暈的風團0.5～1.0cm;伴有紅暈的風團大于1cm 但無偽足;伴有紅暈的風團大于1.5cm,并有偽足。

    ③皮膚試驗應注意的事項: a.囑病人在皮膚試驗前24～48小時,停用抗組織胺藥物及皮質激素,但不必停用喘藥。B.皮膚試驗中,除觀察局部即發(fā)反應外,還應注意觀察病人有無胸悶、氣急、面色蒼白、出冷汗、皮膚瘙癢的皮疹等全身反應,一旦發(fā)現(xiàn)應及時處理,以免發(fā)生危險。C.囑病人回家后,在72小時內繼續(xù)觀察有否遲緩反應。D.對可疑過敏原高度敏感者,盡量不作皮內試驗,以免發(fā)生意外。

    (2)放射過敏原吸附試驗

    放射過敏原吸附試驗,它是特異性過敏原體外測定方法之一,是國外首選的體外診斷方法。它同其他體外測定方法一樣,最大的優(yōu)點是絕對安全,可完全避免體內方法可能發(fā)生的過敏反應 ,同時不會有使病人致敏或增加病人敏感性的危險,尤其對高度敏感的兒童特應性患者更為適宜。該試驗與支氣管激發(fā)試驗的符合率為80%左右,與皮膚試驗的符合率在70%～80%,與白細胞組織胺釋放試驗的相關系數(shù)為0.84。該試驗使用離體血清,便于運輸和保存,在方法上敏感性, 特異性和重復性均很高,易于自動化,因此在國外是廣泛應用而僅次于皮膚試驗的測定方法。但該試驗需要的放射性同位素,價格昂貴,半衰期短,操作和處理均需要專門的設備,使其廣泛應用受到一定的限制。

    ①方法與原理:交聯(lián)于固相載體的可溶性過敏原與含有對過敏特異性IgE的標本作用,加入同位素標記的抗人IgE,使它再與結合在過敏原上的IgE相作用,用γ計數(shù)器測定結合的同位素活性,待測標本中IgE抗體的濃度與測得的同位素活性成正比。

    ②結果判斷:以核素脈沖數(shù)大于正常人平均值(需減去臍血放射性計數(shù)脈沖數(shù)值)3.5倍以上判定為陽性。

   ③激發(fā)試驗

    目前常用的激發(fā)試驗有眼結膜、鼻內及支氣管粘膜激發(fā)試驗。該試驗是唯一直接判斷支氣管哮喘較為敏感的試驗,其結果與患者過敏史、臨床癥狀和放射性過敏原吸附試驗的結果之間有較好的相關性,在哮喘的病因診斷、臨床療效考核等方面有重要的作用,受到國內外重視。但需要一定的檢測條件及技術,并易引起患者的嚴重發(fā)作,故臨床應用上受到限制。

    ①支氣管激發(fā)試驗的方法與原理:用各種可疑致敏原浸液讓患者霧化吸入后,觀察有無哮喘的發(fā)作,并作肺功能測定,從而判斷患者支氣管對各種特異性致敏原的反應性。

    ②結果判斷:凡試驗中出現(xiàn)哮喘發(fā)作,或吸致敏原浸液后,FEV1下降大于15%～25%者為陽性。
 
    ③激發(fā)試驗的注意事項: A.呼吸道感染或肺功能明顯減退者不做該項檢查。B.患者在做試驗前,至少12小時停用β-受體激動劑和磷酸二脂酶抑制劑,24小時前停止用色甘酸鈉,48時前停用抗組織胺藥物,96小時前停用羥嗪類藥物。C.吸入致敏原浸液后至少應觀察30分鐘,有條件者應觀察24小時,便于發(fā)現(xiàn)遲緩反應和雙相反應。D.病人感到反應較重時,應及時處理,或及時吸入氣管解痙劑。

    (4)酶聯(lián)免疫吸附試驗

    酶聯(lián)免疫吸附試驗,簡稱ELISA,是特異性過敏原體外測定方法之一。ELISA的特異性和敏感性與放射過敏原吸附試驗相似。它除了有放射過敏原吸附試驗的優(yōu)點外,而且還有相對廉價、無核素污染，安全和結合物相對穩(wěn)定的特點。在診斷塵螨過敏中,ELISA和放射過敏原吸附試驗的符合率達95%,ELISA與皮膚試驗的符合率為89.5%。

    ①方法與原理:先將過敏原吸附在聚苯乙烯板或管壁上,當加入的待測血清含有特異性抗體時,抗體便能與相應的過敏原結合,再加入酶標記的抗IgE和相應的底物便可產(chǎn)生一定的顏色反應,用分光光度計測定其光密度,可推知特異性IgE的含量。

    ②結果判斷:以高于正常人光密度平均值一倍定為陽性。

    (5)白細胞組織胺釋放試驗

    白細胞組織胺釋放試驗是變態(tài)反應主要測定方法之一,白細胞組織胺釋放試驗與皮試、臨床癥狀和特異性IgE之間均有密切關系。一些報告指出,在變態(tài)反應性疾病診斷中,以臨床病史為對照,白細胞組織胺釋放試驗為90%。

    但此試驗有操作復雜、費時、實驗需血量較多、使用血儲存不便的缺點。

   ①白細胞組織胺釋放試驗的方法與原理:由肝素抗凝白細胞分離,加抗原溫育,然后用正丁醇苯和鹽酸反苯提取組織胺，將組織胺與重結晶后的鄰苯二醛縮合,可在熒光分光光度計下測定。

   ②結果測定:組胺釋放率＞50%為陽性。

   (6)人嗜堿性粒細胞脫顆粒試驗

    該試驗從細胞水平上反映了機體的過敏狀態(tài),為一敏感的體外測定方法。可做為Ⅰ型變態(tài)反應性疾病尋找特異性過敏原的有效手段。此試驗雖實驗條件要求簡單,但操作上較為費時,重復性也較其他方法略差。

   ①原理:嗜堿粒細胞胞漿內的顆粒能被堿性染料染成藍色,極易辨認和計數(shù)。當加入抗原后, 即與結合在細胞上的IgE產(chǎn)生橋連,導致胞漿內的顆粒脫出,不再被染色,致使染色的細胞明顯減少。

   ②結果判斷:染色細胞減少率＞30%定為陽性。